One Step-RNA Reagent

One Step-RNA Reagent

Mô tả sản phẩm: Thuốc thử một bước RNA: 1. Thuốc thử một bước-RNA là thuốc thử sẵn sàng sử dụng để phân lập RNA tổng số từ tế bào và mô. Thuốc thử, một dung dịch đơn pha gồm phenol và guanidine isothiocyanate, là một cải tiến của phương pháp phân lập RNA một bước do Chomczynski và Sacchi phát triển. Trong quá trình đồng nhất hoặc phân tách mẫu, Thuốc thử MỘT BƯỚC-RNA duy trì tính toàn vẹn của RNA, đồng thời phá vỡ tế bào và phân giải các thành phần của tế bào. Việc bổ sung cloroform sau đó bằng ly tâm, phân tách dung dịch thành pha nước và pha hữu cơ. RNA vẫn độc quyền trong pha nước. Sau khi chuyển pha nước, RNA được phục hồi bằng cách kết tủa với rượu isopropyl. Sau khi loại bỏ pha nước, DNA và protein trong mẫu có thể được phục hồi bằng cách kết tủa tuần tự. Kết tủa với etanol tạo ra DNA từ pha giữa, và kết tủa bổ sung với rượu isopropyl tạo ra protein từ pha hữu cơ. Đồng thanh lọc DNA có thể hữu ích để chuẩn hóa sản lượng RNA từ mẫu này sang mẫu khác. 2. Kỹ thuật này hoạt động tốt với số lượng nhỏ mô (50 ~ 100 mg) và tế bào (5 × 106), và số lượng lớn mô (³1 g) và tế bào (> 107), của người, động vật, thực vật hoặc vi khuẩn gốc. Sự đơn giản của phương pháp Thuốc thử MỘT BƯỚC-RNA cho phép xử lý đồng thời một số lượng lớn mẫu. Toàn bộ thủ tục có thể được hoàn thành trong một giờ. RNA tổng số được phân lập bằng thuốc thử ONE STEP-RNA không có tạp chất protein và DNA. Nó có thể được sử dụng để phân tích Northern blot, lai dot blot, chọn lọc poly (A) +, dịch in vitro, xét nghiệm bảo vệ RNase và nhân bản phân tử. Để sử dụng trong phản ứng chuỗi polymerase (PCR), nên xử lý RNA cô lập bằng DNase I cấp khuếch đại khi hai đoạn mồi nằm trong một exon duy nhất. 3. Thuốc thử MỘT BƯỚC-RNA tạo điều kiện phân lập đa dạng các loài RNA có kích thước phân tử lớn hoặc nhỏ. Ví dụ, RNA được phân lập từ gan chuột, được điện hóa trên gel agarose, và nhuộm bằng ethidium bromide, cho thấy các dải rời rạc của RNA trọng lượng phân tử cao có kích thước từ 7 kb đến 15 kb, (bao gồm mRNA và hnRNA) hai dải RNA ribosome chủ yếu ở ~ 5 kb (28S) và ở ~ 2 kb (18S), và RNA trọng lượng phân tử thấp từ 0,1 đến 0,3 kb (tRNA, 5S). RNA được phân lập có tỷ lệ A260 / 280 là 1,6 ~ 1,8 khi được pha loãng vào nước cất. Sản lượng dự kiến ​​của RNA trên mỗi mg mô là: gan và lá lách, 6 ~ 10mg; thận, 3 ~ 4mg; cơ xương và não, 1 ~ 5mg; nhau thai, 1 ~ 4mg. Sản lượng dự kiến ​​của RNA từ 1 × 10 6 Tế bào nuôi cấy là: tế bào biểu mô, 8 ~ 15mg; nguyên bào sợi, 5 ~ 7 × mg.
Tổng kích thước sản phẩm: BS409A (25ml) BS410A (100ml)
Số thùng: 1
Yêu cầu làm lạnh: Tủ đông
Điều kiện vận chuyển: ICE
Mã UNSPSC: 12352204
Danh mục UNSPSC: DNA polymerase